PreCap Desalting 葡聚糖基質(zhì)凝膠過濾層析介質(zhì)填料試劑介紹

PreCap Desalting適用于分子量大于5000Da的蛋白或其他大分子樣品的脫鹽、緩沖液置換或小分子的去除。

PreCap Desalting 葡聚糖基質(zhì)凝膠過濾層析介質(zhì)填料試劑裝有1 ml或5 ml Smartdex G-25中。Smartdex G-25系列介質(zhì)是一類以葡聚糖為基質(zhì)的凝膠過濾層析 （gel filtration chromatography）介質(zhì)，其工作原理主要是利用具有網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的葡聚糖凝膠的分子篩作用，根據(jù)被分離物質(zhì)的分子大小不同來進行分離。

表 1. PreCap Desalting 產(chǎn)品性能

2. 使用說明

2.1緩沖液的準備

所用水和緩沖液在使用之前建議用0.22 pm或0.45 pm濾膜過濾。

平衡液為蛋白脫鹽后，用于保護蛋白的溶液，根據(jù)客戶需求自行選擇。

2.2樣品準備

樣品在上樣前建議離心或用0.22 pm或0.45|jm濾膜過濾，減少雜質(zhì)，防止堵塞柱子。

2.3樣品脫鹽

PreCap Desalting是一種脫鹽預(yù)裝柱產(chǎn)品，可以用各種常規(guī)的中低壓色譜系統(tǒng)，以AKTA儀器使用為例介紹PreCap Desalting的使用方法。

1） 將系統(tǒng)管道中注滿去離子水。去掉預(yù)裝柱上塞，連接至色譜系統(tǒng)，不要旋緊。再折斷預(yù)裝柱下口，將預(yù)裝柱接到色譜系統(tǒng)中，并旋緊。最后旋緊預(yù)裝柱上端的色譜系統(tǒng)接頭。

2） 用3-5倍柱體積的去離子水沖洗出存儲緩沖液。

3） 使用至少5倍柱床體積的平衡液平衡色譜柱。1 ml預(yù)裝柱推薦流速0.2 ml/min, 5 ml預(yù)裝柱推薦流速為1 ml/mino

4） 利用樣品環(huán)上樣。加入10%柱體積的樣品，不足時用平衡液將樣品稀釋至相應(yīng)體積再上樣。

5） 加入平衡液繼續(xù)沖洗，分管收集流穿液，檢測樣品回收率和脫鹽效率。

3. 清洗及保存

如果柱子的流速變慢或者脫鹽效果變差，為除去殘留的雜質(zhì)，如變性蛋白或脂質(zhì)等，有時需要對脫鹽柱進行在位清洗。常用的清洗液為

0.1-0.2 M NaOH或非離子型去垢劑。

1） 使用一倍的柱體積0.1-0.2 M NaOH沖洗介質(zhì)，流速控制在0.2 ml/min左右。

2） 用足夠量的去離子水，沖洗介質(zhì)，1 ml預(yù)裝柱推薦流速0.2 ml/min, 5 ml預(yù)裝柱推薦流速為1 ml/min,直至pH值至中性。

3） 用至少三倍柱體積20%乙醇溶液沖洗介質(zhì)，然后分別蓋上下堵頭和上塞，將介質(zhì)保存于20%乙醇保護液，置于2-8°C保存。 注：不建議介質(zhì)多次重復(fù)再生和使用。

4.PreCap Desalting 葡聚糖基質(zhì)凝膠過濾層析介質(zhì)填料試劑 訂購信息及相關(guān)產(chǎn)品

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